微生物檢測的檢驗方法小結(jié)

    微生物檢測方法一：沉降法

    將盛有培養(yǎng)基的平皿放在空氣中暴露一定時間，經(jīng)培養(yǎng)后計算出其上所生長的菌落數(shù)。此法簡單，使用普遍，由于只有一定大小的顆粒在一定時間內(nèi)才能降到培養(yǎng)基上，因此，所測得微生物數(shù)量欠準確，檢驗結(jié)果比實際存在數(shù)量少，并且也無法測定空氣質(zhì)量，所以，僅能粗略計算空氣污染及了解被測趣味生物的種類。

    【檢驗方法】

    （1）將一直被好的營養(yǎng)瓊脂、查氏培養(yǎng)基及高氏1號三種平板置于待測地點，打開皿蓋在空氣中暴露5~10min。

    （2）蓋上培養(yǎng)皿蓋，置于℃培養(yǎng)24~45h，根據(jù)平板上所生長的菌落數(shù)計算出1m?或1L空氣中的細菌總數(shù)。

    （3）計算，奧梅梁斯基認為：在面積為100cm2平板瓊脂培養(yǎng)基表面上，5min降落的細菌數(shù)經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù)和10L空氣中所含的細菌數(shù)相當。根據(jù)奧氏公式計算

    式中X—每1m?空氣中的細菌個數(shù)；

    式中N—5min降落在平板上，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù)；

    式中r—平皿底半徑。

    經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)，用奧氏公式計算的浮游細菌數(shù)比實測的浮游細菌少。原因是此公式?jīng)]有考慮塵埃粒子大小、數(shù)量、氣流情況、人員密度和活動情況。

    微生物檢測方法二：撞擊法

    以縫隙采樣器為例，用吸風機或真空泵江含菌空氣以一定流速穿過狹縫而被抽吸到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)及平板上。狹縫長度為平皿的半徑，平板與縫的間隙有2㎜，平板以一定的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)。通常平板轉(zhuǎn)動一周，取出置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)的48h，根據(jù)空氣中微生物的密度可調(diào)節(jié)平板狀動的速度。采集含菌高的空氣樣品時，平板轉(zhuǎn)動的速度要比含菌zui低的空氣樣品的轉(zhuǎn)速快。根據(jù)取樣時間和空氣流量算出單位空氣中的含菌量。采樣器的規(guī)格各國不一，可按說明書操作。

    微生物檢測方法三：過濾法

    該法是抽取定量空氣通過一種液體吸收劑，然后取此液體定量培養(yǎng)計數(shù)出菌落數(shù)。

    （1）將無菌的液體培養(yǎng)基或無菌水與真空泵相連，以每分鐘10L速度取空氣樣并劇烈震蕩，使阻流在液體中的氣溶膠或微生物均勻分散。

    （2）吸取上述含菌液體吸收液1mL與融化冰冷卻到45℃左右的營養(yǎng)液瓊脂做傾注培養(yǎng)，同時做三個平行試驗，置37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h，計算平均菌落數(shù)。根據(jù)下列公式計算

    式中X—每1m?空氣中的細菌數(shù)；

    式中Vs—吸收液體量，mL；

    式中Va—空氣過濾量，L；

    式中N—每1mL液體培養(yǎng)基中的細菌數(shù)。

    微生物檢測方法四：簡易定量測定法

    用無菌注射器定量抽取空氣，將所取空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)部，經(jīng)培養(yǎng)后，即可定量、定性測定空氣中微生物，此法簡單易行。

    （1）將無菌固體培養(yǎng)基融化后，在50℃水浴中保溫備用。

    （2）利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100mL。

    （3）在無菌操作下，取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中，平皿稍作傾斜，將注射器插入培養(yǎng)基深處，緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)，輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固，置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后統(tǒng)計菌落數(shù)量，推算1L空氣所含菌量。通過菌落形態(tài)定性微生物，如統(tǒng)計霉菌數(shù)量時培養(yǎng)的時間稍許延長。應用此法需多做平行試驗，求其平均值以提高準確性。